Produktions- und Zuchttechnologie von Flammulina velutipes

Flammulina velutipes ist ein Gemüse mit sehr hohem Nährwert, deshalb werde ich Ihnen heute etwas über die Produktions- und Züchtungstechnologie von Flammulina velutipes erzählen:

1. Kauf von Flammulina velutipes-Stämmen und wichtigsten Anlagen und Geräten für die Produktion

1.1 Haupteinrichtungen. Die Größe des Impfraums, des Kulturraums, des Operationssaals und des Lagerraums hängt vom Produktionsumfang ab.

1.2 Hauptausrüstung. Saubere Werkbank (oder Impfbox), Box mit konstanter Temperatur, Operationstisch, Drehstuhl, Hochdrucksterilisator, Normaldrucksterilisator, Stahltopf, Waage, Tischwaage, Messzylinder, Glasflasche, Reagenzglas usw.

1.3 Auswahl der Bakterienstämme. Wählen und kaufen Sie hervorragende Sorten mit hoher Qualität, hohem Ertrag, hoher Stressresistenz, stabilen Eigenschaften, schnellem Wachstum, hoher Reinheit, frei von fremden Bakterien sowie frei von Krankheiten und Schädlingen.

2. Auswahl und Herstellung des Kulturmediums für jeden Stamm

2.1 Herstellung des Mutterkultur-Schrägmediums:

Rezept: ① 200–250 g Kartoffeln, 20 g Agar, 20 g Zucker, 1000 ml Wasser, pH auf 6,5 eingestellt. ②200–250 Gramm Kartoffeln, 20 Gramm Agar, 20 Gramm Glukose, 1000 Milliliter Wasser und den pH-Wert auf 6,5 einstellen. ③ 200–250 Gramm Kartoffeln, 5 Gramm Magnesiumsulfat, 20 Gramm Zucker, 100 Milliliter Vitamin B1 (B2), 2,50 Gramm Kaliumdihydrogenphosphat, 20 Gramm Agar, 1000 Milliliter Wasser und den pH-Wert auf 6,5 einstellen.

Zubereitung: Die Kartoffeln in Scheiben schneiden und 30 Minuten in einem Stahltopf kochen. Den Saft mit vier Lagen Gaze filtern, Agar und andere Zutaten hinzufügen und umrühren, bis sich alles aufgelöst hat. Dann Zucker hinzufügen, mit Wasser auf 1000 ml auffüllen und in ein Kulturröhrchen mit einem Fassungsvermögen von 1/5 der Röhrchenlänge geben.

2.2 Herstellung des Kulturmediums für Ursprungsarten und Kulturarten:

Formel ① Sägemehl-Nährmedium: 73 % Laubbaumspäne, 1 % Saccharose, 2,50 % feine Reiskleie (oder Weizenkleie), 1 % Calciumcarbonat, Wasser-Material-Verhältnis 1:1,20–1,30.

② Baumwollsamenschalen-Nährmedium: Baumwollsamenschalen 88 %, Saccharose 1 %, Feinzucker (oder Weizenkleie) 10 %, Calciumcarbonat 10 %, Wasser-Material-Verhältnis ist das gleiche wie bei ①.

③Weizenkorn-Nährmedium: Weizenkörner (oder Maiskörner sind auch akzeptabel) 99 % Calciumcarbonat 1 %, Wasser-Material-Verhältnis 1:1,20.

Zubereitung: Verschiedene Zutaten im angegebenen Verhältnis abwiegen und vermischen. Zucker und Chemikalien in Wasser auflösen, zum Material hinzufügen und gut vermischen. Die zum Auflösen verwendete Wassermenge im Wasser-Material-Verhältnis aufzeichnen. Baumwollsamenschalen sollten vor dem Mischen mit Wasser vorgefeuchtet werden; Weizenkörner sollten vor dem Mischen eingeweicht und dann in einem Topf gekocht werden, bis die Weizenkörner nicht mehr zerbrechen. Nehmen Sie sie heraus und trocknen Sie sie, bevor Sie sie mit anderen Materialien mischen. Nachdem alle Materialien gemischt sind, werden sie in Flaschen abgefüllt, wobei die Füllmenge 1/3 der Flaschenkapazität beträgt.

3. Flüssige Stammzubereitung

Rezept: ① 3 % Glucose, 1 % Maismehl, 2 % Sojamehl, 0,20 % Calciumcarbonat, 0,10 % Kaliumdihydrogenphosphat, 0,50 % Hefepulver, 0,05 % Magnesiumsulfat. Alle Zutaten in Wasser auflösen und gut vermischen, um eine Suspension zu erhalten. 30 Minuten kochen lassen, den Überstand entnehmen und auflösen, dann in einen 500 ml Erlenmeyerkolben mit 10 kleinen Glasperlen geben.

Formel ② 20 % Kartoffeln, 0,20 % Protein, 20 % Glukose, 0,05 % Kaliumdihydrogenphosphat, 0,05 % Magnesiumsulfat, 0,01 % Kaliumchlorid. Extrahieren Sie das Filtrat auf herkömmliche Weise aus Kartoffeln, fügen Sie andere Zutaten hinzu, fixieren Sie die Lösung und füllen Sie sie in die Flasche.

Rezept ③: 5 % Maismehl, 0,50 % Hefepulver, 4 % Saccharose, 0,20 % Calciumcarbonat, VB1 mg. Die Zubereitung erfolgt wie bei Rezept ①.

3.1 Sterilisation des Nährmediums und Desinfektion der Räumlichkeiten und Geräte

3.2 Mutterkultur-Schrägmedium. Für die Hochdrucksterilisation von flüssigem Kulturmedium verwenden Sie 1,10 kg pro tausend Zentimeter und sterilisieren Sie 30 Minuten lang bei 121 °C. Legen Sie festes Bakterienkulturmedium nach der Sterilisation sofort auf eine Schräge, wobei die Länge der Schräge 1/2 der Länge des Reagenzglases betragen sollte.

3.3 Kulturmedium für Stamm- und Zuchtarten. Im Autoklav bei einem Druck von 1,50 kg pro tausend Zentimeter sterilisieren und 1 Stunde bei 121 °C sterilisieren. Bei Nährböden mit Weizenkörnern als Ausgangsstoff sollte die Sterilisationszeit entsprechend verlängert werden. Es kann auch mit Normaldruckdampf sterilisiert werden, d. h. 8 Stunden lang bei 100 °C.

3.4 Desinfektion der Einrichtungen. Der Impfraum, der Kulturraum und der Operationssaal können mit erhitztem Formalin begast oder mit Schwefelpulver verbrannt werden. Die Dosierung beträgt 10 ml Formalin pro Kubikmeter Raum und 15 Gramm Schwefelpulver pro Kubikmeter Raum. Verwenden Sie eine wässrige Lösung aus Calciumhypochlorit (20-40 Gramm pro tausend Kubikmeter) und 2%-3% Lysol, um den Boden und die Wände zu besprühen.

3.5 Desinfektion der Geräte. Die saubere Werkbank und die verschiedenen Werkzeuge sollten mit 70 % Alkohol oder 5 % Karbolsäure und 0,25 % Chlorhexidin eingeweicht und geschrubbt werden. Vor der Impfung das UV-Licht zur Sterilisation für 15 Minuten einschalten.

4. Inokulation und Kultivierung von Bakterien

4.1 Impfung und Kultivierung der Mutterstämme. Während der Inokulation zeigt das Reagenzglas (Flaschenöffnung) nach unten und in die Nähe der Flamme der Alkohollampe. Verwenden Sie eine Impfnadel, um das Myzel im Mutterreagenzglas zusammen mit dem ursprünglichen Kulturmedium in kleine Stücke von 0,50 cm x 0,50 cm zu schneiden. Bewegen Sie sie in die Schräge eines neuen Reagenzglas-Kulturmediums, verschließen Sie sie fest mit Watte und legen Sie sie 8-10 Tage lang in eine 23 °C konstante Temperaturbox oder einen Kulturraum, bis das Myzel die gesamte Schräge bedeckt.

4.2 Impfung und Kultivierung von Ursprungsarten und Kulturarten. Nehmen Sie mit einer Impfnadel einen 1 Quadratzentimeter großen Myzelblock aus dem Mutterteströhrchen und impfen Sie ihn in das Kulturmedium in der Originalsamenflasche (oder der Flasche mit den kultivierten Samen). Ebenso sollte sich die Flaschenöffnung nahe an der Flamme der Alkohollampe befinden und die Geschwindigkeit sollte hoch sein. Nach dem Anschließen stopfen Sie es mit Baumwolle aus und legen es zur Kultivierung in einen Kulturraum bei 23 °C.

4.3 Beimpfung und Kultivierung von Flüssigstämmen: Beimpfen Sie ein 2 cm2 großes Stück des kräftig wachsenden schrägen Mutterstamms nach der Hochdrucksterilisation in das flüssige Kulturmedium, so dass die Seite des dampfgetragenen Myzels nach oben an der Flüssigkeitsoberfläche hängt, und kultivieren Sie es 2-3 Tage lang statisch bei 23 °C, und stellen Sie es dann für 3-4 Tage in eine zusammengesetzte Schüttelflaschenmaschine (Schwingungsfrequenz 80-100 Mal/Minute), um die Kultur zu schütteln. Wenn die Flüssigkeit hellgelb, klar und durchsichtig ist und einen Duft hat, bringen Sie sie in den desinfizierten Beimpfungsraum, gießen Sie die Flüssigkeit an der Flammenöffnung der Alkohollampe auf die Oberfläche des desinfizierten Kulturmediums, die Menge beträgt 10-15 ml pro Flasche, und stellen Sie sie dann für etwa 27 Tage in einen Kulturraum bei 23 °C, bevor sie als Kultivierungssorte verwendet werden kann. Das Besondere an flüssigen Stämmen ist, dass sie als Stammstämme verwendet werden können, wenn die Menge der Stammstämme gering ist. Die Kultivierung in flüssigem Kulturmedium dauert nur etwa eine Woche, was viermal kürzer ist als die Kultivierung fester Stammstämme. Darüber hinaus ist das Alter der Stämme gleichbleibend, das Myzel ist gesund und die Vitalität kräftig.

5. Erhaltung von Flammulina velutipes-Stämmen

5.1 Lagerung bei niedrigen Temperaturen. Legen Sie die am Hang gewachsenen Bakterien in einen 4 °C-Kühlschrank und verpflanzen Sie sie alle 5 Monate einmal.

5.2 Bei Raumtemperatur lagern. Nachdem das mit Sägemehl hergestellte Kulturmedium vollständig mit Myzel bewachsen ist, wird es mit Paraffin- und Wattestopfen verschlossen und bei Raumtemperatur gelagert.

5.3 Lagerung von flüssigem Stickstoff. Die Stämme werden in Flüssigstickstofftanks bei -130–-193 °C gelagert.